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PCR實驗常見失敗原因、及對策分析及體系優化

PCR雖然為一個簡單的實驗，但在實際過程中可能會出現各種問題。產生問題的原因可能來源于以下幾個方面：實驗操作，試劑質量，PCR反應過程中各種試劑的含量，以及反應條件，溫度設置等，本文對各個方面進行了討論，大家遇到問題后可以對號入座的查一下。當然，具體問題的解決還依靠實驗者就可能的原因逐項排除，并不斷的摸索才能*解決。假陰性，不出現擴增條帶PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備，②引物的質量與特異性，③酶的質量及，④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。模板：①...

伯樂CFX96Touch實時熒光定量PCR儀和CCD成像有什么區別？

伯樂CFX96Touch實時熒光定量PCR儀比普通的PCR儀多了熒光信號采集系統和計算機分析處理系統，實時熒光定量PCR儀主要是用來定量分析和確定基因轉錄水平的，而普通的PCR儀是做定性分析和擴增基因片段，定量PCR儀可以做普通PCR儀的工作，而反之就不行了，況且這樣代價太大了，一般的實驗室都不允許這樣做的。總之兩者的功能不能互相取代。伯樂CFX96Touch實時熒光定量PCR儀因操作方便、運行速度快、實驗結果準確，必然會從好設備變成分子生物學實驗室的基礎設備。熒光定量PCR...

熱循環PCR儀如何選型？

購買一臺新的PCR儀，這真是件幸福的事，畢竟以后大家就不用苦苦排隊了。然而，這也不是個輕松的差事，市場上有那么多種儀器可以選擇，光是比較參數，就夠累了。況且PCR儀還是實驗室中的老黃牛，幾乎24小時運轉，買臺可靠的儀器尤為重要。一想到這兒，是不是更感覺壓力山大。在簽下訂單前，也許你該考慮以下五個方面。終點、定量還是數字？如今的PCR儀器主要分為三大類：標準PCR（終點PCR）、實時定量PCR（qPCR）以及數字PCR（dPCR）。前兩者大家都很熟悉，而后者是這兩年冉冉升起的新...

PCR技術分享（原理、分類、步驟及主要試劑、設備準備）

聚合酶鏈式反應（PCR）原理DNA的半保留復制時，雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。在實驗條件下，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。PCR類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性-退火(復性-延伸...

PCR熱循環儀操作指南

一、開機連接電源線后，打開機器后部的主開關（在機器的左下角）。開機后機器進行自檢“SelfTest”，自檢結束后出現用戶主界面，顯示加熱模塊“Block”格式和溫度“Temp”和熱蓋溫度“Lid”，在屏幕左上角顯示“Ready”。二、程序設置1.建立新程序按“File”→“New”→“Program”，進入一個編輯窗口輸入程序名稱按“Enter”鍵確認，之后進入程序編輯器；在“Header”中設置熱蓋的參數，輸入溫度和壓力，溫度默認值為96℃，一般設置為99℃，如變性溫度較低...

離心機在哪些領域中可以使用

早在19世紀離心機就在工業生產中取得了應用。起先，離心機應用于牛奶分離、紡織品脫水和制糖廠結晶砂糖的脫水。目前，離心機已廣泛應用于化工、石油、冶金和水處理等眾多領域。離心機的傳動方式經歷了從手搖式到電動式、機械變速、油壓氣壓為動力的機械變速直至當今的變頻電機變速的過程。耐磨技術的不斷取得突破，如硬質合金、陶瓷的廣泛應用，也推動著離心機的應用領域快速拓展。3.1在聚合樹脂領域在處理聚氯乙烯（PVC）過程中，離心機的處理能力大可達到15～18t/h（以干粉計），分離后的清液中固體...

雙十一應節氣活動價開始啦！奧林巴斯顯微鏡尋找專屬的你

本公司針對雙十一，現貨優惠服務活動開始啦!!!雙十一活動，拿出我們誠意，全新進口機器，讓你用的滿意，服務一直到底，您好在等什么呢？奧林巴斯顯微鏡常用型號優惠，打折打折在打折，歡迎盡情詢價。以下型號超低優惠服務，只要入手，不會后悔!正置顯微鏡奧林巴斯CX23生物顯微鏡奧林巴斯CX33生物顯微鏡奧林巴斯CX43生物顯微鏡倒置顯微鏡奧林巴斯CKX53倒置顯微鏡體式顯微鏡奧林巴斯SZ61體式顯微鏡CX33相應參數：用途：可用于普通染色的切片觀察，以及臨床、科研常規顯微檢驗工作。1．工...

為什么伯樂MicroPulser電穿孔儀1652100使用前要預熱？

伯樂MicroPulser電穿孔儀1652100是功能強大的將核酸、蛋白質以及其它分子導入多種細胞的有效技術。通過高強度的電場作用，瞬時提高細胞膜的通透性，從而吸收周圍介質中的外源分子。伯樂MicroPulser電穿孔儀1652100的這種技術可以將核苷酸、DNA與RNA、蛋白、糖類、染料以及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對于其它物理和化學轉化方法，是一種有價值和有效的替代方法。廣泛用于植物、動物和微生物的各類細胞電穿孔。方波和指數波型確保所有細胞類型（原核及真核）...

奧林巴斯CX23生物顯微鏡的目鏡怎么放置？

奧林巴斯CX23生物顯微鏡可分為光學放大及電子放大兩大類。前者按用途可分為普通型、特種型、型顯微鏡和手術顯微鏡。普通型生物顯微鏡僅供一般用途使用，通常的農用與醫用顯微鏡、倒置顯微鏡均屬這一類。奧林巴斯CX23生物顯微鏡由物鏡和目鏡兩部分組成。因為被觀測的物體本身不發光，而借助于外界照明，故顯微鏡需要有一個照明系統，這些部分都是由較復雜的透鏡組成，尤其物鏡更為復雜。特種型生物顯微鏡可作某些專用的觀察和研究。暗場生物顯微鏡、熒光顯微鏡、偏光顯微鏡、相襯和干涉相襯顯微鏡等均屬于這一...

實驗室中的小能手，艾本德移液器專屬

EppendorfResearchplus手動移液器可實現輕松移液的超輕移液器，融合超過60年的液體處理經驗，是實科研實驗常用的移液器之一。艾本德采用開創性的EppendorfPhysioCareConcept®，Researchplus移液器具備出色的人體工程學性能，同時可在實驗室保護您的身體健康。艾本德移液器具備非常低的重量和操作力度，可高壓滅菌，并且易于使用。艾本德也針對科研的需求提供多種產品型號，包括固定或可調量程單道移液器，8道、12道、16道或24道的多道...