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技術文章

PCR系統臺式計算機的原理是什么?

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PCR儀(聚合酶鏈式反應儀,Polymerase Chain Reaction Machine)的工作原理基于DNA復制的自然過程,通過模擬DNA復制的關鍵步驟,在體外快速擴增特定的DNA片段。以下是PCR儀工作原理的詳細解釋:


一、基本步驟原理

1、變性:

將反應體系加熱到 90℃-95℃左右,此時雙鏈 DNA 分子的氫鍵斷裂,兩條互補鏈解開成為單鏈 DNA,便于后續以單鏈為模板進行新鏈合成。例如,常見的基因組 DNA 經過這一高溫處理后,原本的雙鏈結構會被打開,形成單鏈狀態。

2、退火:

溫度降低至 50℃-65℃左右,根據引物(人工合成的短鏈 DNA 片段,能與目標 DNA 序列兩端特異性結合)的堿基組成和長度等因素確定具體溫度。在這個溫度下,引物可以按照堿基互補配對原則,結合到單鏈 DNA 模板上與之互補的特定區域,為后續 DNA 新鏈的合成確定起始位置。

3、延伸:

溫度升高到 70℃-75℃左右,這個溫度是 DNA 聚合酶的最適作用溫度,在 DNA 聚合酶(常用的如 Taq DNA 聚合酶等,它具有熱穩定性,能耐受高溫變性步驟的反復加熱)的催化作用下,以單鏈 DNA 為模板,以 dNTP(脫氧核苷三磷酸,是合成 DNA 的原料)為底物,按照堿基互補配對原則,從引物的 3’端開始逐個添加脫氧核苷酸,合成與模板鏈互補的新 DNA 鏈。


二、循環擴增

經過變性、退火、延伸這一循環后,DNA 的量實現了一定程度的增加,一條雙鏈 DNA 經過一輪循環后變成了兩條雙鏈 DNA。然后不斷重復上述三個步驟,每循環一次,DNA 的數量就會以指數形式增長,經過幾十次循環后,就可以獲得大量的目標 DNA 片段,便于后續進行檢測、分析等操作。、


總之,PCR 儀通過精確控制溫度變化,按照設定好的程序讓反應體系反復經歷變性、退火、延伸的循環過程,實現對特定 DNA 片段的體外大量擴增。

TEL:18016231680

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