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賽默飛371 CO?培養箱是一款高精度、多功能的培養箱，能夠為細胞提供一個穩定、無污染的培養環境。操作步驟主要包括設備準備、參數設置、樣品處理與擺放、運行監控以及實驗結束后的處理等多個環節。以下是對這些步驟的詳細闡述：
一、設備準備
1、安裝與環境要求：將培養箱放置在平穩的臺面上，避免振動，遠離陽光直射、通風口或其他熱源。室溫應在 15°C 至 30°C 之間，濕度保持在 30%-70%，確保設備附近電源接地良好，使用穩定的電壓。
2、設備檢查：檢查電源連接是否牢固，CO?氣瓶壓力是否充足（通常需配備 99.5% 純度以上的醫療級 CO?），確保門封條完好無損，檢查濕度盤內水量是否足夠。
3、開機初始化：插入電源，開啟主電源開關，等待顯示屏啟動，查看自檢結果，確認溫度、濕度和 CO?濃度顯示正常，無報警提示。
二、參數設置
1、溫度設置：按操作界面上的 “溫度" 設置按鈕，輸入目標溫度值（如 37°C，適合大多數哺乳動物細胞培養），確認并保存，系統會自動調整至設定溫度。
2、CO?濃度設置：按操作界面上的 “CO?濃度" 設置按鈕，輸入目標 CO?濃度值（一般為 5%），確認并保存，設備開始調整內部 CO?濃度，確保氣體供應正常，觀察濃度是否穩定。
3、濕度管理：加入適量去離子水或蒸餾水至濕度盤，避免使用自來水以防止水垢堆積。默認濕度一般保持在 90%-95% RH，無需手動調節。
4、校準：溫度校準，根據標準溫度計核實設備內實際溫度是否與設定值一致；CO?校準，定期使用校準氣體（如 5% CO?）檢查和調整傳感器。
三、樣品處理與擺放
1、樣品準備：
樣品容器（如培養瓶、培養皿）需提前滅菌，確保樣品無污染。
2、樣品擺放：
將樣品均勻放置在培養箱內的擱板上，避免過于密集。
保留足夠的氣流通道，以確保箱內溫濕度和CO?濃度均勻。
四、滅菌操作步驟
1、高溫滅菌：
清空培養箱內部，移除所有實驗樣品、培養皿以及試劑瓶。
取出可拆卸的內部組件（如擱架、濕度水槽、CO?傳感器等），傳感器通常不耐高溫，必須取出或使用保護罩（根據具體型號說明）。
關閉CO?鋼瓶，斷開連接。
在控制面板上選擇“高溫滅菌模式"或“Sterilization Cycle"，系統會默認設置至140°C，時間通常為12小時（包括升溫、滅菌、降溫三個階段）。無需額外調整，直接確認運行。
滅菌程序結束后，培養箱會自動冷卻至安全溫度（通常在40°C以下），方可打開門。
冷卻完成后，將拆卸的組件（濕度水槽、擱架、傳感器等）重新安裝回培養箱。
重新連接CO?鋼瓶，確保氣體供應正常。
2、手動滅菌（如培養箱內部組件不耐高溫）：
使用無腐蝕性的消毒劑（如70%乙醇或過氧化氫溶液）對內部進行清潔。
用無絨布擦拭培養箱內壁、門封條和擱架。
對濕度水槽單獨浸泡消毒，并清洗。
如培養箱不自帶紫外線燈，可使用外置UV燈進行滅菌。將紫外線燈放置于培養箱內部，保持門關閉，開啟UV燈運行30分鐘至1小時。
